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编号:13138909
脉络宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究(2)
http://www.100md.com 2014年2月15日 《中国中药杂志》 2014年第4期
     2.2 MCAO法建立大鼠脑缺血/再灌注模型 SD大鼠术前12 h禁食,10%水合氯醛(350 mg·kg-1)腹腔注射麻醉,仰卧位固定。参照Longa等[6]的大脑中动脉线栓法,造成左侧大脑中动脉阻塞。缺血2 h后,将栓线向外拉出至颈内实现再灌注。假手术组只进行术前麻醉和血管分离术,不结扎及导入线栓。

    2.3 神经功能缺损评分 再灌注24 h后进行大鼠神经行为学观察。参照Longa等的5级4分制:0分,无神经功能缺失症状;1分,不能完全伸展对侧前爪;2分,爬行时出现对侧转圈;3分,行走时向对侧倾倒;4分,不能自发行走,意识丧失。

    2.4 组织病理切片的制备 大鼠于再灌注24 h后,用10%水合氯醛(350 mg·kg-1) 腹腔麻醉,开胸经心脏灌流生理盐水,然后以4%多聚甲醛灌流固定,断头取脑,将脑组织放入4%多聚甲醛继续固定48 h,常规梯度乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋处理,自视交叉后行冠状切片,层厚5 μm,常规HE染色。

    2.5 免疫组织化学染色 用SABC法进行免疫组化染色,检测GFAP,Ibal蛋白表达。取脱蜡后切片加入PBS缓冲液 ......
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